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            SUPER Green I 核酸染料(電泳級)

            更新時(shí)間:2019-04-15

            簡要描述:

            SUPER Green I 核酸染料(電泳級)本品用DMSO溶解,因DMSO的熔點(diǎn)是18.5℃,使用前請放置到室溫充分溶解。SUPER Green I核酸染料特點(diǎn)
            ● 無毒性:靈敏度高, 信噪比高, 操作簡單:適用范圍廣:使用方便: 經(jīng)濟(jì):

            SUPER Green I 核酸染料(電泳級)

            中文英文CAS貨號價(jià)格
            SUPER Green I (效果同SYBR Green I)核酸染料(10,000× DMSO溶液)(電泳級)SUPER Green I nucleic acid gel stain *10,000× concentrate in DMSO* (Electrophoresis Grade)163795-75-3001-50μL400
              163795-75-3001-100μL680
              163795-75-3001-500μL2950

            SUPER Green I使用方法簡介

            1.膠染法(用法同EB)

            (1) 制膠時(shí)加入SUPER Green I 核酸染料。冷卻膠至50℃左右,每100mL膠中加入3~5μL

            SUPER Green I 核酸染料。

            (2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳即可。

            注:此方法染色可以準(zhǔn)確確定核酸片段分子量,染料用量相對較少。1mL染料大約可以做300塊 100mL的膠。

            2.點(diǎn)染法

            (1) 該方法適于瓊脂糖凝膠電泳和PAGE凝膠電泳。

            (2) 工作液的配制:用電泳緩沖液將10000×的SUPER Green I 稀釋100倍,即為SUPER Green I 工作液。SUPER Green I 工作液可以置2~8℃保存一個(gè)月以上。

            (3) 制膠:按常規(guī)方法制膠,不含任何染料。

            (4) 樣品染色:向分析樣品中加入SUPER Green I 工作液和載樣緩沖液,室溫放置10分鐘,使SUPER Green I 與樣品中DNA充分結(jié)合。SUPER Green I 工作液加入量為總上樣量的1/5~1/10。

            (5) DNA Marker染色:將5μL DNA Marker、5μL DNA Marker稀釋液和1μLSUPER Green I 工作液混勻,室溫放置5分鐘,使SUPER Green I 與DNA充分結(jié)合。

            (6) 上樣、電泳:按常規(guī)操作。

            注:用點(diǎn)染法染色時(shí),靈敏度較高,染料用量少。但大片段稍有滯后現(xiàn)象,如果需要更準(zhǔn)確確定分子量(與Marker對比),建議使用膠染法。

            3.泡染法

            (1) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

            (2) 用pH 7.0~8.5 的緩沖液(如:TAE,TBE 或 TE),按照10000﹕1的比例稀釋SUPER Green I 濃縮液,混勻,制成染色溶液。

            (3) 將染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中,放入凝膠,用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10~30分鐘,染色時(shí)間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色,將配好的稀釋溶液輕輕地倒在膠板上,讓稀釋液均勻地覆蓋整個(gè)膠板,并染色30分鐘。玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。

            注:用泡染法染色時(shí),可以精確確定核酸片段分子量。但染料用量是三種方法中多的。

            4.  點(diǎn)染+膠染法

            此法結(jié)合方法1和方法2,靈敏度較高,對于低濃度樣本比EB檢測更靈敏。

            幾種染色方法特點(diǎn)比較

            1.png

             

            SUPER Green I 核酸染料(電泳級)(10,000× DMSO溶液)用注意事項(xiàng):(效果同SYBR Green I)

            (1) 在SUPER Green I點(diǎn)染法中,電泳時(shí)間不要超過2小時(shí),否則SUPER Green I會(huì)從DNA上分離出來,會(huì)產(chǎn)生彌散狀條帶。

            (2) 用點(diǎn)染方法染色時(shí),條帶稍有滯后現(xiàn)象,如果需要確定片段精確分子量(與Marker對比),建議使用膠染法(方法1)。

            (3) 在常規(guī)用酒精沉淀核酸的過程中,SUPER Green I可以全部從雙鏈核酸上去掉。

            (4) 如果想對用 SUPER Green I 染過的膠進(jìn)行 Southern blots,建議在預(yù)雜化和雜化溶液中加入 0.1%~0.3% 的SDS。

            (5) 在紫外照射下,與雙鏈 DNA 接合的 SUPER Green I呈現(xiàn)綠色熒光。如果膠中含有單鏈 DNA 則顏色為橘黃而不是綠色。

            (6) SUPER Green I對玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器。

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